怎樣保證試驗(yàn)樣品的可重復(fù)性、均一性?
還在為以上問題頭疼?小編為您解決!
biofuture全自動(dòng)核酸提取儀ME320特點(diǎn):
速度快、通量高、靈敏度高、重復(fù)性好,提高自動(dòng)化,減少人為誤差----減少人控環(huán)節(jié)及人控影響因素
ME320技術(shù)中應(yīng)用的磁珠
內(nèi)核:鐵氧體
內(nèi)核表面:覆蓋高分子惰性材料
表面標(biāo)記和處理:不同材料
New TiO2:磷酸化多肽富集磁珠
硅質(zhì):用于核酸的純化
IMAC和GSH磁珠:純化GST蛋白
TALON、Ni磁珠:純化His蛋白
Protein A和G:純化IgG
反相RPC和WCE:純化多肽片段
特異性抗體:分離蛋白和細(xì)胞
ChargeSwitch磁珠:類似離子交換磁珠,純化核酸
可以自己標(biāo)記磁珠的表面:標(biāo)記研究者自己的抗體
傳統(tǒng)離心純化法
A.直接離心沉淀DNA |
B.介質(zhì)離心沉淀DNA |
C.介質(zhì)離心結(jié)合DNA |
酚抽提,酒精沉淀 ?處理量大,回收率高 ?核酸沉降慢,離心時(shí)間長 |
介質(zhì)(如玻璃珠)輔助離心 ?處理量大,沉降快離心短 ?回收率略低 |
離心柱法 ?速度快,操作簡單 ?結(jié)合力弱,回收率低 |
ME320提取核酸原理
應(yīng)用磁珠純化技術(shù),可以利用磁鐵特異吸附核酸,省去離心操作,擺脫了離心機(jī)限制,不僅節(jié)省時(shí)間,同時(shí)使高通量純化成為可能。
轉(zhuǎn)移磁珠代替轉(zhuǎn)移溶液
1、減少人工誤差,提高重復(fù)性;2、避免吸液放液操作較少交叉污染;
3、實(shí)現(xiàn)快速高通量操作;4、磁珠的高結(jié)合能力和轉(zhuǎn)移效率提高檢測靈敏度。
轉(zhuǎn)移液體 |
轉(zhuǎn)移磁珠 |
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兩種磁珠純化法的比較 |
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轉(zhuǎn)移液體的磁珠純化法 |
轉(zhuǎn)移磁珠的磁珠純化法 |
轉(zhuǎn)移液體 |
需要轉(zhuǎn)移液體,可能漏液,造成交叉污染 |
無需轉(zhuǎn)移液體,無交叉污染 |
速度 |
吸排液體+外側(cè)吸附磁珠或離心,體耗時(shí)較長 |
僅需內(nèi)側(cè)吸附磁珠,節(jié)省時(shí)間 |
回收率 |
磁珠沉降慢,吸液時(shí)有磁珠損耗 |
內(nèi)部磁棒吸附,磁珠回收高,幾乎無殘留 |
液體殘留 |
吸液不充分,有液體殘留,難以控制殘留量 |
無需吸液,直接高效率轉(zhuǎn)移磁珠,幾乎無殘液 |
操作成本 |
需移液器,消耗吸頭、微孔板or離心管、試劑 |
無需移液器,消耗微孔板、試劑 |
ME320“簡單”
ME320節(jié)省時(shí)間
純化32個(gè)樣品,用ME320 可以節(jié)省60分鐘
用 ME320 純化的和用Qiagen QIAamp 純化的DNA 的質(zhì)量相當(dāng)
高均一性、重復(fù)性
適用于中小樣品通量,體積小,靈活方便,操作簡單